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太哇塞了!改变这步,死活培养不好的球状细胞居然长成了!

人阅读 发布时间:2023-05-19 11:24

了解球状 3D 细胞培养
 

多细胞球体是常见的 3D 细胞培养体系之一,能够由单一细胞类型产生,也能够通过共培养方式由不同种类的细胞产生。随着生物医药技术的发展,多细胞球体因具有更旺盛的细胞分泌状态及接近体内的细胞微环境,其广泛地应用于药物高通量筛选、肿瘤模型建立、内皮血管生成、类器官培养、组织再生和 3D 打印等诸多研究领域。
 

数十年来,多细胞球体培养技术蓬勃发展,然而新手操作起来还是会存在一些技术难点。我们整理了比较普遍的几点供大家参考:
 

难点 1:细胞因子低活性导致多细胞球体诱导生长失败

解决办法:加入具有安全性、有效性和一致性的高质量重组细胞因子。
 

难点 2:细胞换液导致细胞丢失及成像扭曲

解决办法:使用 U 型板底减小细胞与板底的接触;还可以选择换液比较方便且涂层更坚固的 96 孔板培养 3D 细胞。
 

难点 3:频繁换液和洗涤导致水凝胶表面损坏,细胞贴壁生长

解决办法:选择耐刮擦表面的培养耗材。
 

做 3D 细胞培养的科研人,一定了解水凝胶,它由于其特殊的结构和性能,一直被作为 3D 细胞培养有利的培养基质,但水凝胶存在成胶时间长或结构疏松、原位凝胶形成控制性能差等缺点,也极大地限制了其进一步应用。
 

你是否也在为多细胞球体培养而烦恼呢?莎斯特研发出了一款帮助细胞快速成球的 96 孔板,已经实现了许多具有挑战性的细胞球培养,比如原代干细胞的球体,只需要 2 到 24 小时即可完美成球!操作简单,避免了让人心力交瘁的反复离心和换液,初学者妥妥上手。赶紧点击链接领取吧!

免费试用,速戳>>:BIOFLOAT™ 3D细胞培养96孔板

 

这几年大家总结出了各种经验,不断优化实验流程,促进细胞成球。其中耗材的优化是很具有现实价值的一步。莎斯特研制的专门针对 3D 细胞培养的 BIOFLOAT™ 96 孔板大大地帮助了科研人,它的优势也很明显:


快速成球:BIOFLOAT™ 表面能够确保快速成球。细胞系、细胞类型不同,成球时间也不同,一般需要 2~24 小时。实验测试表明,相比其他类似产品,相同细胞在相同培养条件下,在该表面上更易成球(图 1)。

图 1:BIOFLOAT™ 细胞培养板促使细胞快速成球。每孔接种 200 微升细胞密度为 30000 个细胞/毫升的 3T3 细胞悬浮液。


重复性高:借助 BIOFLOAT™ 表面形成的球体具有极高的圆形度,由此可实现数据的高度一致性。不会形成沉积物、卫星团聚体或不规则聚合体,从而确保了极高的可重复性(图 2)。
 

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图 2:BIOFLOAT™ 表面形成的球体具有极高的圆形度。每孔接种 200 微升细胞密度为 30000 个细胞/毫升的 3T3 细胞悬浮液。数值越高,代表球体越圆。数值 1 代表正圆形。


BIOFLOAT™ 表面具有高度抗粘附特性。体外培养的贴壁细胞,无法粘附于培养容器表面,细胞与细胞之间更容易形成接触。涂层坚固,非常便于日常实验使用,表面特性不会因为多次洗涤或移液器吸头碰触而受损(图 3,4)。
 

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图 3:BIOFLOAT™ 细胞培养板与无涂层细胞板培养细胞效果对比。将 3T3 细胞以不同的细胞密度接种在 BIOFLOAT™ 细胞培养板上,无涂层培养板组作为对照。三天后通过显微镜记录结果,可以明显看到 BIOFLOAT™ 上已成功形成球体且球体大小可能受到每个孔细胞数量的影响。相反,在无涂层表面上,3T3 细胞可以贴壁生长,但不能形成球体。


图 4:使用标准移液器吸头轻微刮擦孔底(中等压力刮擦一遍),再用大力刮(约 30 秒)。每孔接种 200 微升细胞密度为 30000 个细胞/毫升的 3T3 细胞悬浮液。
 

适合难成球的细胞类型培养:得益于 BIOFLOAT™ 细胞培养板表面的可靠质量,即使是难度高的细胞也可培养出完美球体,比如原代肝脏细胞培养(图 5)。 

图 5:BIOFLOAT™ 细胞培养板培养原代肝细胞,第八天就培养出相对完美的球状原代肝细胞。


与 2D 培养相比,多细胞球体培养模型通常被认为更具有生理相关性的系统。多细胞球体能够准确地反映复杂的体内微环境,并且成功地应用于诸多研究领域,如干细胞生物学研究、抗病毒药物学研究、癌症生物学研究、神经生物学研究、胰腺研究、肝毒性研究和肾病学研究等。上述研究彻底地改变了学界对细胞在培养和体内行为的理解,对于人类攻克重大疾病具有重要的指导意义和参考价值。


BIOFLOAT™ 培养板具有帮助细胞快速成球、重复性高、适合难成球细胞类型培养的特点。对细胞培养的新手也很友好,无需离心,换液方便,不惧刮擦!你确定不 pick 一下?

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